Tasvirlash paytida jonli hujayra ko'rish tizimida hujayra hayotiyligini saqlab qolish muammolari

Jonli hujayra tasviri hujayra biologiyasi, neyrobiologiya, farmakologiya va rivojlanish biologiyasi kabi biomedikal tadqiqot fanlarini o'rganadigan laboratoriyalarda muhim tahliliy vositadir. Ruxsat etilgan hujayralar va to'qimalarni suratga olish (ular uchun fotooqartirish asosiy masala) odatda yuqori yorug'lik intensivligini va uzoq ta'sir qilish vaqtini talab qiladi; ammo tirik hujayralarni tasvirlashda ulardan qochish kerak. Jonli hujayra mikroskopiyasi odatda tasvir sifatini olish va sog'lom hujayralarni saqlash o'rtasidagi kelishuvni o'z ichiga oladi. Shuning uchun, yuqori yorug'lik intensivligi va uzoq ta'sir qilish vaqtini oldini olish uchun tajribada fazoviy va vaqtinchalik o'lchamlari ko'pincha cheklanadi. Jonli hujayralarni tasvirlash optik mikroskop uchun kontrastli tasvirlash usullarining keng doirasini o'z ichiga oladi. Ko'pgina tadqiqotlar floresan mikroskopiyaning ko'p turlaridan birini qo'llaydi va bu ko'pincha quyida muhokama qilinadigan uzatiladigan yorug'lik texnikasi bilan birlashtiriladi. Tasvirlash texnikasi va lyuminestsent zondlarni loyihalash sohasidagi doimiy yutuqlar ushbu yondashuvning kuchini yaxshilaydi, bu esa jonli hujayrali tasvirni biologiyada muhim vosita bo'lib qolishini ta'minlaydi.

Sintetik floroforlar yoki lyuminestsent oqsillar mavjud bo'lganda, mikroskop bosqichida yorug'lik bilan hujayralar yaxshi holatda bo'lishi va normal ishlashini ta'minlash muhim ogohlantirishdir. Hujayralarni mikroskop bosqichida saqlash shartlari, garchi keng o'zgaruvchan bo'lsa ham, ko'pincha tajribaning muvaffaqiyati yoki muvaffaqiyatsizligini belgilaydi.

Hujayralarning o'ziga xos biokimyoviy talablari asosida turli xil hujayra madaniyati vositalari mavjud. Madaniy muhitda turli xil tarkibiy qismlar, jumladan, aminokislotalar, vitaminlar, noorganik tuzlar (minerallar), mikroelementlar, nuklein kislotalarning tarkibiy qismlari (asoslar va nukleozidlar), qandlar, trikarbon kislotalar aylanishining oraliq moddalari, lipidlar va kofermentlar mavjud. To'qimachilik muhitida muhim qadam kislorod konsentratsiyasi, pH, buferlash qobiliyati, osmolyarlik, yopishqoqlik va sirt tarangligini nazorat qilishdir. Savdoda mavjud bo'lgan ommaviy axborot vositalarining formulalari ko'pincha taxminiy pH qiymatini vizual aniqlash uchun indikator bo'yog'ini (masalan, fenol qizil) o'z ichiga oladi. Deyarli barcha hujayra liniyalari uchun pH ni tartibga solish uchun karbonat angidrid va bikarbonat tampon tizimi kerak. Eritilgan gaz konsentratsiyasini nazorat qilish uchun hujayralarni inkubatorlarda oz miqdorda karbonat angidrid (odatda 5-7%) o'z ichiga olgan atmosferada etishtirish kerak. Jonli hujayra tasviri uchun karbonat angidrid bilan mos atmosferani ta'minlash qiyin bo'lishi mumkin va bu odatda tartibga solinadigan atmosfera uchun maxsus mo'ljallangan madaniyat kameralarini talab qiladi. Kislorodga bo'lgan ehtiyoj hujayra qatorlari orasida farq qilishi mumkin, ammo atmosfera kislorodining normal kuchlanish darajasi ko'pchilik madaniyatlar uchun mos keladi. Osmolyarlikka kelsak, hujayra liniyalarining ko'pchiligi osmotik bosimga katta tolerantlikka ega, 260 dan 320 milliosmolyargacha bo'lgan osmolyarlarda yaxshi o'sadi. Hujayralar ochiq plastinka kulturalarida yoki Petri idishlarida o'stirilganda, bug'lanishni engish uchun gipotonik muhitdan foydalanish mumkin.